第一章 上帝的手术刀

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]    再者，cAS发挥作用时，需要靶标基因的上游存在一个特定的短的碱基序列，称之为pA列（对于最广泛使用的cRISpR-cAS9，一般为NGG，其中N为任意一种碱基）。如果实际操作中靶标基因片段上游到处都没有pA列，则cRISpR-cAS系统无法发挥剪切作用。这种情况也可以叫做脱靶。

    在他看来，微针是世界上最帅的东西。

    [4]脱靶：cRISpR-cAS的识别序列通常是20个左右碱基对，相对于生物的dNA很短，这种短碱基片段在dNA长链中随处可见。所以用它剪切dNA的时候，可能也同时剪掉了非靶标位点，造成各种乱七八糟的突变，导致细胞死亡。

    [1]RNp：核糖核蛋白复合物。是向导RNA和cas蛋白的复合体，向导RNA可以找到要剪的基因片段的位置，cas蛋白可以把dNA剪断。

    [3]cRISpR:成簇的规律间隔的短回文重复序列。将它配合上相关的核酸内切酶（简称cas）就可以切割dNA。cRISpR-cAS技术与锌指核酸酶技术、“神话”核酸酶（tALEN）技术并称基因编辑三大“剪刀”。

卵母细胞中。

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    其次，cRISpR-cAS对错误的容忍度比较高，即便某一段碱基片段与靶标片段不完全一致，也能发挥剪切作用，造成脱靶。总之，只要是剪错了地方，就叫做脱靶。

    因为那是上帝的手术刀。

    [2]腺病毒：一种无外套膜的双链dNA病毒，有很高的基因包装能力，常作为基因编辑载体。